小鼠主動脈內(nèi)皮細胞適用于各種組織的原代培養(yǎng)

　　小鼠主動脈內(nèi)皮細胞是從供體中取得組織或細胞后在體外進行的培養(yǎng)，原代培養(yǎng)不僅是建立各種細胞系的開始，也是從事組織或細胞培養(yǎng)工作人員應熟悉和掌握的基本的技術(shù)。

　　原代培養(yǎng)的組織或者細胞的生物學特性沒有發(fā)生很大變化，仍具有二倍體遺傳物質(zhì)，接近和反映體內(nèi)生長特性，很適合作藥物測試、基因表達測試、細胞分化等實驗研究。原代培養(yǎng)是獲取細胞的主要手段，但原代培養(yǎng)的組織由多種成分組成，比較復雜，即使同一類型細胞如成纖維樣細胞或上皮樣細胞，細胞間也存在很大差異。如果供體不同，即使組織類型、部位相同，個體差別也可以在細胞上反映出來。

　　因而原代細胞的部分生物學特征尚不穩(wěn)定，如要做較為嚴格的對比性實驗研究，還需要對原代培養(yǎng)的細胞進行短期傳代后再進行(需要注意的是有些細胞在傳代后可能會發(fā)生一些生物學特性的變化)。一般采用2-5代的細胞進行實驗。當然特殊情況和一些終端分化細胞如神經(jīng)細胞、巨噬細胞、心肌細胞除外。小鼠主動脈內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)的方法很多，基本和常用的為組織塊原代培養(yǎng)法和離散細胞原代培養(yǎng)法(消化法)。

　　小鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)法是原代細胞培養(yǎng)常用的基本方法，適用于各種組織的原代培養(yǎng)，特別是難以消化的組織，組織塊原代培養(yǎng)法操作程序簡單，培養(yǎng)前不經(jīng)過酶液處理，細胞損傷較小。但由于培養(yǎng)過程中細胞移動受到較大限制，完成原代培養(yǎng)所需的時間較長。

　　 細胞培養(yǎng)的程序一般為：

　　1.組織塊修整：將組織塊用平衡緩沖液反復沖洗，然后在滅菌的培養(yǎng)皿中剪碎至碎塊的直徑小于1mm。

　　2.貼壁：將組織塊間隔(小塊之間的間隔為1cm)放在培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基需要浸沒組織塊底部但不能使組織塊浮起。

　　3.培養(yǎng)：通過生長繁殖，細胞可以從組織塊邊緣向四周游出，生長繁殖連成片，原組織塊可以*消失。